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贮藏条件和时间对蔬菜中亚硝酸盐含量的影响

发布时间:2012-09-20

贮藏条件和时间对蔬菜中亚硝酸盐含量的影响

1.实验原理

实验样品经沉淀蛋白质除去脂肪后,在弱酸条件下硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,生成的重氮化合物,再与萘基盐酸二氨乙烯偶联成紫红色的重氮染料,产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,其最大吸收波长为538nm ,测定吸光度并与标准比较定量。

2.材料用具

黄瓜1180g、茄瓜、小白菜770g、菠菜380g、土豆900g、白萝卜1530g

亚铁氰化钾、乙酸锌、冰乙酸、四硼酸钠、对氨基苯磺酸、36.46%的盐酸、盐酸萘乙二胺、亚硝酸钠、活性炭。

分光光度计、小型搅碎机、干燥箱、电磁炉和锅、电子天平、恒温水浴锅、冰箱、250mL容量瓶18个、150mL锥形瓶3个、大试剂瓶1个、托盘2个、250mL量筒2个、移液管(25mL 2支,5mL4支,10mL1支,2mL8支,1mL3支)、烧杯(250mL2个,150mL3,50mL10个)。

3.方法步骤

3.1试剂配制

①亚铁氰化钾溶液:称取106g亚铁氰化钾,溶于水,并稀释至1000mL

②乙酸锌溶液:称取220g乙酸锌,加30mL冰乙酸溶于水,并稀释至1000mL

③饱和硼砂溶液:称取5g硼酸钠,溶于100mL热水中,冷却后备用。

0.4%对氨基苯磺酸溶液:称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20的盐酸中,置棕色试剂瓶中混匀,避光保存。

0.2%盐酸萘乙二胺溶液:称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,混匀后,置棕色试剂瓶中,避光保存。

⑥亚硝酸钠标准溶液:准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入500mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。此溶液每毫升相当于200ug亚硝酸钠。

⑦亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL,置于200mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。此溶液每毫升相当于5ug亚硝酸钠。

3.2材料处理

将购回的6种新鲜菜样分别均等分为3份:一份常温下贮藏;一份在冰箱中冷藏;最后一份在冰箱中用保鲜膜密封冷藏测定蔬菜中亚硝酸盐的含量时,本实验采用国家标准中推荐的 “盐酸萘乙二胺比色法”。

3.3样品处理

①称取10.0g经绞碎混匀的样品,置于50mL烧杯中。②在烧杯中加入25mL硼砂饱和溶液,搅拌均匀。

③以70℃的水150mL将样品全部洗入250mL容量瓶中。置沸水浴中加热15min,取出后冷至室温。

④加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。

⑤定容:加水至刻度,混匀,放置0.5h,除去上层脂肪。

⑥过滤:用滤纸过滤,在滤纸上均匀撒上活性炭约3g,弃去初滤液30mL,后取40mL滤液备用。

3.4绘制亚硝酸钠标准曲线

分别取00.200.400.600.801.001.502.002.50mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0123571012.5ug亚硝酸钠),分别置于50mL带塞比色管中分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置15min后各加入1mL 0.2%盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min,用2cm比色杯,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度,记录结果(表1),绘制标准曲线比较,同时做试剂空白试验。

3.5亚硝酸盐含量的测定

吸取40mL上述滤液于50mL带塞比色管中,加入2mL 0.4%对氨基苯磺酸溶液,混匀,静置3~5min后各加入1mL盐酸萘乙二胺溶液,加水至刻度,混匀,静置15min,用2cm比色杯,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度。样品中亚硝酸盐的含量X(mg/kg)= (m为样品质量,gA为测定用样液中亚硝酸盐的质量,ugV1为样品处理液总体积,mLV 2为测定用样液体积,mL;结果的表述需报告算术均值的两位有效数。)

3.6记录结果

连续测定第5d不同实验材料在常温、冷藏和冷藏密封条件下亚硝酸盐的含量,记录如表2

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4.分析结果,得出结论

通过表中数据绘制曲线。

本实验的结论:________________________________________________________

5.讨论

①本实验的研究结果对你有什么启示?

②如果想进一步探究不同的冷藏时间下蔬菜中亚硝酸盐的含量,应如何设计实验?

编制:路洪娜

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